冬虫夏草制剂的补肾壮阳作用研究

2020-08-16 编辑：藏红花

本实验给阳虚证小鼠和去势大鼠定量饮用冬虫夏草发酵液及冬虫夏草制剂Ñ和Ò，结果发现3样品均能改善小鼠的阳虚症状，使阳虚小鼠的体重、自主活动次数增加，低温游泳的存活时间明显延长;使去势大鼠的生殖器官重量增加，阴茎勃起潜伏期缩短。

冬虫夏草(CordycepsSinensis)可用于阳痿遗精、腰腿酸软和肾功能衰竭等。我们采用深层发酵法生产冬虫夏草，分别利用冬虫夏草发酵液和发酵菌丝，辅以其它营养成分，配制成冬虫夏草制剂Ñ和Ò，现对冬虫夏草发酵液及两种冬虫夏草制剂的补肾壮阳作用做一观察研究。

对阳虚证小鼠的影响实验方法:将200只雄性小鼠随机分为5组:正常对照组(自来水20ml/kg#d)、阳虚证模型组(氢化可的松25ml/kg#d)、氢化可的松+冬虫夏草发酵液组(20ml/kg#d)、氢化可的松+虫草制剂Ñ组(20ml/kg#d)、氢化可的松+虫草制剂Ò组(20ml/kg#d)。每组40只。各组每日以给水形式喂饲，饲养2个月，每半个月取样1次，每次10只/组，共取样4次，取样前5d开始对实验的10只/组小鼠肌注氢化可的松，1次/d，共5次。记录各组实验动物体重、体温、自主活动次数(10min内)及低温游泳存活时间。然后杀死小鼠，取血，分离血清，用放射免疫法测定血清睾酮。

对肾虚大鼠的影响实验方法:Wistar大鼠80只，随机分5组，每组16只。其中4组大鼠在戊巴比妥钠(1%，715ml/kg)麻醉下，消毒阴囊皮肤，摘除双侧睾丸，术后肌注青霉素G钾2万单位/kg，分为去势模型组(自来水20ml/kg#d)、冬虫夏草发酵液组(冬虫夏草发酵液20ml/kg#d)、虫草制剂Ñ组(虫草制剂20ml/kg#d)、虫草制剂Ò组(20ml/kg#d)。另设正常对照组:同龄未去势组。以上5组均以给水形式喂养。大鼠饲养2个月，每月取样1次，每次8只/组，共2次。饲养到期后，首先将生理多功能刺激器(辽宁师大生物系动物生理教研室仪器)的刺激电极放置于大鼠阴茎部位，给予局部电刺激，刺激振幅96V，频率8次/s，记录从刺激开始至阴茎勃起时间(勃起潜伏期)。然后将动物处死，迅速称取包皮腺、精液囊、前列腺及提肛肌的重量。

结果进行统计学分析，采用组间对比的t检验。冬虫夏草制剂对阳虚证小鼠低温游泳存活时间的影响:大剂量氢化可的松可造成小鼠阳虚证，使小鼠耐寒、耐疲劳能力下降。虫草制剂Ñ和Ò能够明显延长小鼠低温游泳存活时间，而且随着服用时间的延长，小鼠低温游泳的存活时间也明显延长，服用1个月后，虫草制剂Ñ组低温游泳存活时间比阳虚组延长123187s，虫草制剂Ò组延长43153s。冬虫夏草发酵液组也有一定延长，但效果弱于其它两样品。

冬虫夏草制剂对阳虚证小鼠自主活动数的影响:喂养30天后，阳虚证小鼠自主活动次数明显低于正常对照组，冬虫夏草制剂Ñ组小鼠自主活动次数比阳虚组10min内多718次，虫草制剂Ò组多516次。服用2个月，虫草制剂Ñ组比阳虚组活动次数多1212次，虫草制剂Ò组多912次。随着服用时间的延长，效果明显。

冬虫夏草制剂对阳虚证小鼠体重的影响:服用样品15d后，阳虚组小鼠体重明显低于正常组，样品组比阳虚组体重有所增加，但不显著;1个月后，3个样品组体重明显高于阳虚组，尤其是虫草制剂Ò组效果非常明显，随着服用时间延长，效果更加明显。

冬虫夏草制剂对阳虚证小鼠体温影响:正常小鼠的体温在37~39e，氢化可的松对小鼠的体温无明显影响，服用冬虫夏草发酵液及虫草制剂组的小鼠的体温与正常对照组、阳虚组相比无明显变化，可见样品对小鼠体温影响不大。

冬虫夏草制剂对阳虚小鼠雄性激素的影响:阳虚组小鼠雄性激素水平剧烈下降，服用3种样品1个月后，小鼠的雄性激素都有所增加，但仍低于正常组。服用样品1.1 5个月以后，3个样品组的雄性激素水平均恢复到正常小鼠的水平，其中虫草制剂Ò组的雄性激素水平增加明显，显著高于正常组。2.2 冬虫夏草制剂对肾虚动物的影响。壮阳实验:服用样品30d，去势大鼠的阴茎勃起潜伏期即恢复到正常大鼠的时间，明显短于去势模型组(P<0101)。对肾虚动物生殖器官重量的影响:肾虚大鼠(去势大鼠)各生殖器官的重量明显低于正常大鼠。服用3种样品30天后，小鼠的包皮腺、提肛肌及前列腺加精液囊的重量明显高于去势模型组，而且随着喂养时间延长，重量也明显增加，其中虫草制剂Ñ组效果最好。

运动性疲劳属中医虚证(脾虚、肾虚、气虚、阴虚等)范围，故普遍采用补益的方法，或兼以活血化淤法等，而肾虚在运动性疲劳或性机能低下者多见。本实验中所采用的组方Ñ与Ò配方原则有所不同，组方Ñ采用虫草发酵液，以补肾壮阳、健脾理气为主，发酵液中含有胞外虫草多糖，其虫草酸含量较少。在组方Ò中含有虫草菌丝，胞内多糖，虫草酸含量较多，兼以滋阴潜阳、补气补血。两者的效果均较理想。中医认为，脾为后天之本，气血生化之源，脾主四肢肌肉，与运动关系密切，故同为补肾助阳，亦应兼顾健脾理气，补气补血，滋阴潜阳。以往常用的补益药研究很多，但采用现代制药技术充分发挥中医药本身的优势，提高制剂的有效成分的浓度及含量，是单一药物及其配方研究的重要方面。本实验中所用的冬虫夏草菌丝及发酵液均是采用工业化深层发酵的方法获得，生产质量稳定，有效成分含量固定，不受环境污染。本研究中所采用的组方Ñ与Ò分别采用冬虫夏草发酵液和发酵菌丝直接入药，其主要特点是在冬虫夏草发酵菌丝培养中，其菌丝的代谢产物，即菌丝分泌的虫草多糖、可溶性蛋白等分布在分泌液中，并通过发酵配制成发酵液，两者均可提高药物有效成分在体内的吸收、转化。

本研究利用氢化可的松造成小鼠阳虚证模型，给药后，动物出现明显的阳虚证表现，体重减轻，活动能力减弱，耐寒耐疲劳能力下降，经服用样品一个月后，症状明显改善，甚至消失，结果证明两种虫草制剂具有益气壮阳之功效，能够增强动物机体生理功能，提高对外界不良刺激的耐受力。去势大鼠的生殖器官重量降低非常明显，生殖器官趋于萎缩。两种虫草制剂及冬虫夏草发酵液可以明显增加肾虚动物生殖器官的重量，缩短阴茎勃起潜伏期，而且随着服用时间延长，效果更明显。这说明，两种虫草制剂及其发酵液对大鼠体内的雄激素产生与释放起促进作用。

本实验通过建立实验动物模型，结果显示，冬虫夏草发酵菌丝与其他中草药有机配伍，可明显增加阳虚证小鼠的自主活动次数，对阳虚小鼠体内雄激素水平有提高作用；可增强机体生理功能；缩短肾虚大鼠阴茎勃起潜伏期，对肾虚大鼠生殖器官重量的恢复提高有促进作用。

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